核酸檢測PCR建設(shè)要點 核酸檢測中，應(yīng)該如何PCR實驗室如何設(shè)計規(guī)劃才堪稱？PCR實驗室管理又有哪些注意要點？ PCR實驗室分為六個區(qū)域，分別為： 1.更換服區(qū)域 2試劑配制區(qū)； 3.樣品處理區(qū)； 4.核酸擴增區(qū)； 5.產(chǎn)物分析區(qū) 6.消毒自凈區(qū) 傳統(tǒng)PCR為四個區(qū)域，為配合核酸檢測沃霖實驗室建議增設(shè)兩個區(qū)域，一個區(qū)域為前段更換服，一個區(qū)域為 消毒自凈室區(qū)。 一、PCR實驗室設(shè)計規(guī)劃 如使用全自動分析儀，區(qū)域可適當(dāng)合并。 沃霖實驗建議：進入各工作區(qū)域必須嚴格按照單一方向進行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服，例如不同的顏色。工作人員離開各工作區(qū)域時，不得將工作服帶出 二、PCR實驗室平面布局 試劑準(zhǔn)備區(qū)：擴增試劑的配制、分裝和保存。 樣品處理區(qū)：樣品登記、分裝；核酸提取、保存和加樣。 擴增產(chǎn)物分析區(qū)：擴增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析、登記及報告 擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應(yīng)嚴格分開，須使用不同的房間，兩區(qū)之間好有一定的間隔。 使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進行少量試劑配制。 在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準(zhǔn)備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi)： 在生物安全柜內(nèi)操作； 每個實驗人員、實驗組分別使用各自的試劑及耗材； 盛放污染材料的器皿密封并一次性使用； 用有效的方法對操作區(qū)域和共享器具在實驗前后進行清潔及消毒。 三、PCR實驗室建設(shè)規(guī)劃介紹 1、主體結(jié)構(gòu)： 主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結(jié)構(gòu)牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。 2、標(biāo)準(zhǔn)的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)： 將PCR過程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區(qū)。整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨立實驗區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)，同時各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié)，使整個PCR實驗過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。 可打開緩沖區(qū)Ⅰ，緩沖區(qū)Ⅱ和PCR擴增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣，在實驗區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口，空氣通過回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。 3、消毒： 在三個實驗區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。 在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)還設(shè)置移動紫外線燈，對實驗桌進行局部消毒。 4、機械連鎖不銹鋼傳遞窗： 試劑和標(biāo)本通過機械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標(biāo)本在傳遞過程中不受污染（人物分流） 5、地面 地面建議使用PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少800mm×800mm）接縫需要小于2mm。 6、照明 燈具要選用凈化燈具，能達到便于清洗、不積塵的特點。 在建設(shè)的過程中應(yīng)注意 ●規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。 ●嚴格按照規(guī)范科學(xué)設(shè)計的安裝流程。 ●安裝前需要確定以下安裝條件，如：電源電壓，電源進線位置，電話網(wǎng)絡(luò)線進線位置，進水水壓，小安裝空間，地面平整度，通風(fēng)孔、進水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空間尺寸和通風(fēng)口尺寸。 四、PCR實驗室設(shè)計要點 PCR實驗室可以是分散形式，也可以是組合形式。完成一組PCR實驗，通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個實驗過程，若實驗工藝需要，還應(yīng)增加樣品粉碎過程。 一、分散形式PCR實驗室 所謂分散形式PCR實驗室，是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠，呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實驗室，由于各個實驗之間不易相互干擾，因此無需特殊條件要求。 二、組合形式PCR實驗室 所謂組合形式PCR實驗室,是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置，組成獨立實驗區(qū)域的形式。對于組合形式PCR實驗室，由于各個實驗間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間，以減少室內(nèi)外空氣交換。 PCR實驗室建設(shè)一些經(jīng)驗分享： 試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入，造成污染； 可以通過控制進風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達到正壓效果。 核酸擴增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負壓，以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品，可以通過控制排風(fēng)風(fēng)量大于進風(fēng)風(fēng)量達到負壓效果。 在理想情況下，PCR實驗室緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。PCR實驗室進風(fēng)由原有空調(diào)控制，要求將空調(diào)風(fēng)口安裝到定點，且高度為地面鋪裝好后2600mm處。 如果使用熒光PCR儀，擴增室和產(chǎn)物分析室可以合并。 若房間進深允許，可設(shè)PCR內(nèi)部走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面，緩沖間比走廊更有意義。 各個區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實驗之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。 | 
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